HuGen線粒體全基因組測序試劑盒錨定國際標準，破解法醫(yī)難題！
發(fā)布日期：2025-12-02;
國際法醫(yī)遺傳學(xué)學(xué)會（ISFG）DNA委員會發(fā)布的《線粒體DNA分型修訂及擴展指南》，是全球法醫(yī)mtDNA檢測領(lǐng)域的 “金標準”—— ISFG指南圍繞mtDNA檢測的全流程，重點討論了異質(zhì)性、數(shù)據(jù)質(zhì)量控制、數(shù)據(jù)庫檢索與統(tǒng)計評估等關(guān)鍵問題，并提出了具體建議，以確保 mtDNA 分型結(jié)果在法醫(yī)案件中的可靠性與證據(jù)效力。
01
目標區(qū)域、擴增及測序范圍
mtDNA控制區(qū)（CR）包含絕大多數(shù)與法醫(yī)環(huán)境中單倍型區(qū)分相關(guān)的快速進化位點，傳統(tǒng)方案針對CR的高變區(qū)片段（HVS-I：16024–16365、HVS-II：73–340、HVS-III：340–576）進行檢測，但在法醫(yī)案件中，僅靶向HVS-I/II數(shù)據(jù)會限制mtDNA 檢測的能力；鑒于完整CR對案件工作與群體數(shù)據(jù)庫應(yīng)用的價值，建議盡可能生成完整CR數(shù)據(jù)。此外，該領(lǐng)域可能會朝著使用 “下一代”或“大規(guī)模并行” 測序方法發(fā)展，建議開發(fā)至少針對完整CR的方案。
02
異質(zhì)性精準解讀
指南明確，異質(zhì)性（點異質(zhì)性PHP與長度異質(zhì)性LHP）是mtDNA檢測的核心關(guān)注點之一。在單個樣本中，PHP常表現(xiàn)為單一位點的混合堿基信號，LHP則多出現(xiàn)于多聚核苷酸區(qū)域（如HVS-I的16189位多聚C、HVS-II的302-310位多聚C），二者的誤判或遺漏，可能直接影響鑒定結(jié)論的準確性。
03
適配數(shù)據(jù)庫檢索，滿足司法證據(jù)要求
對mtDNA數(shù)據(jù)庫檢索提出明確標準：需覆蓋完整數(shù)據(jù)庫，忽略高變多聚片段（如16189位、310位附近多聚C）的長度變異，同時采用保守的統(tǒng)計方法評估匹配顯著性。此外，當核DNA檢測效果不佳時，需支持mtDNA與常染色體STR結(jié)果的聯(lián)合分析，提升證據(jù)效力。
指南建議：
在用于法醫(yī)數(shù)據(jù)庫構(gòu)建的群體遺傳學(xué)研究中，應(yīng)對mtDNA的整個控制區(qū)進行測序。
對于兩種其他方面完全一致的單倍型，即便在點異質(zhì)性和長度異質(zhì)性上存在差異，這些差異也不能作為排除它們源自同一來源或相同母系譜系的證據(jù)。
在進行檢索時，需針對所有可用序列的完整數(shù)據(jù)庫，結(jié)合測序（解讀）范圍開展檢索，以避免查詢結(jié)果出現(xiàn)偏差。
在估算（mtDNA單倍型）頻率而進行數(shù)據(jù)庫檢索時，應(yīng)忽略同源多聚片段中的長度變異等變異度極高的位點。對于異質(zhì)性標注，檢索方式需確保不排除任何一種異質(zhì)性變異類型。
HuGen線粒體全基因組測序試劑盒
01
全基因組無死角覆蓋，契合指南序列要求
針對指南 “全序列分析” 的核心訴求，HuGen線粒體全基因組測序試劑盒采用創(chuàng)新疊瓦式擴增技術(shù)，通過2個引物池共131個擴增子，實現(xiàn)人類mtDNA全基因組（16569bp）的完整覆蓋 —— 既包含10個高變區(qū)擴增子（覆蓋HVS-I、HVS-II 等關(guān)鍵區(qū)域），也囊括121個編碼區(qū)擴增子，一次性獲取高變區(qū)與保守區(qū)的全部突變信息。
02
高靈敏度+標準化分析，攻克異質(zhì)性解讀難題
依托二代測序的高通量優(yōu)勢，該試劑盒可精準捕捉單一位點的混合堿基信號，即便樣本中存在低比例異質(zhì)性（如1%以下的突變型），也能被清晰識別。同時，試劑盒配套的分析軟件嚴格遵循IUPAC命名規(guī)范標注混合堿基，支持正反向測序結(jié)果交叉驗證，匹配指南對PHP、LHP的解讀標準。
03
短擴增子+高穩(wěn)定性，破解疑難樣本鑒定瓶頸
法醫(yī)實踐中，陳舊骨骼、火災(zāi)遇難者遺骸等高度降解樣本，常因DNA片段短、濃度低導(dǎo)致核DNA檢測失效。HuGen線粒體全基因組測序試劑盒針對性優(yōu)化擴增子設(shè)計，將大部分擴增子長度控制在200bp以內(nèi)，可高效擴增降解樣本中的短片段mtDNA，打破 “樣本差 = 檢測難” 的困境。實驗數(shù)據(jù)更印證其硬核性能：從10pg到5ng的不同起始模板量（覆蓋法醫(yī)常見樣本濃度范圍），試劑盒均實現(xiàn)100%突變檢出率。
04
全流程自動化，提速司法檢測效率
安科華捷構(gòu)建了 “樣本 - 文庫 - 測序 - 分析” 全流程自動化解決方案：適配國產(chǎn)化高通量自動化建庫工作站，實現(xiàn)文庫制備的標準化操作，減少人工干預(yù)與樣本損耗；搭配專業(yè)二代測序儀與高精度分析軟件，可自動完成序列比對、突變檢測等分析，大幅縮短實驗周期。
從陳舊骨骼的個體識別，到復(fù)雜母系親緣的認定，再到大規(guī)模遇難者的身份匹配，HuGen線粒體全基因組測序試劑盒始終以 “精準、高效、合規(guī)” 為核心，將ISFG 指南的要求轉(zhuǎn)化為實實在在的檢測能力，為司法機關(guān)破解疑難案件提供關(guān)鍵技術(shù)支撐，讓每一份證據(jù)都經(jīng)得起科學(xué)檢驗，讓每一次鑒定都守護司法公正。
